Home, grave, Indice alfabetico, Collegamenti, Patologia, Molecole, Sindromi, Muscoli, Giunzioni neuromuscolari, Nervi, Spinale, Atassia, Anticorpi e Biopsia, Informazioni per i pazienti TRADUZIONE di Natale Marzari

 CLINICHE LABORATORY

PRINCIPLE:

Miopatia con IgM Legante to Decorin

Questa protocol è applicati nel routine colorazione del Cationic e anionic tissue componenti nei tissue sezioni. Questa è the standard reference colore usati nel study of tissue patologia simply dal its lunghezza use.

SPECIMEN REQUIRED:

Snap frozen human striated muscolare. (Use the isopentano freezing method previously descritti.)

METHOD:

Fixation: Nessuno, use snap frozen tissue.

Tecnica: Cut 10 - 16 micron (12 µm) sezioni nei cryostat dal snap frozen biopsy. Attach uno o più sezioni to a No.1½, 22 mm square coverslip

Equipment:

Ceramic colorazione rack - Thomas Scientific #8542-E40

Columbia colorazione dish - Thomas Scientific #8542-C12

Columbia colorazione dish(jar) - Thomas Scientific #8542-E30

Forceps latex gloves

Reagents:

Reagent alochol - HPLC Fisher A995-4 o histological A962, FLAMMABLE store at room temp. nei a flammable cabinet

Eosin Y, disodium salt (Sigma #E-6003, store at room temperature)

Harris Hematoxylin Stain, acidified (Lerner Laboratories #1931382)(R.T.)

Permount - Fisher SP15-100, FLAMMABLE HEALTH HAZARD

Xylenes (Fisher #HC700-1GAL, FLAMMABLE, store R.T. nei flammable cabinet)

1. Eosin Y, 1 % aqueous (store at room temperature)

Eosin Y dye 1 g

Deionized acqua 100 ml

2. Harris Hematoxylin, acidified (store at room temperature)

Filter (Baxter #F2217-150, Grade 363, Qualitative) prima use

3. Alcohol 50 %

Reagent alcohol ~50 ml

Deionized acqua ~50 ml

4. Alcohol 70 %

Reagent alcohol ~70 ml

Deionized acqua ~30 ml

5. Alcohol 80 %

Reagent alcohol ~80 ml

Deionized acqua ~20 ml

6. Alcohol 95 %

Reagent alcohol ~95 ml

Deionized acqua ~ 5 ml

Staining Procedure:

1. Place the coverslip con section nei a ceramic colorazione rack (Thomas Scientific #8542-E40).

2. Immerse sezioni nel filtered Harris Hematoxylin per 1 minute.

3. Remove rack to a beaker con tap acqua.

4. Exchange tap acqua fino alla the acqua è chiara.

5. Immerse sezioni nei EOSIN colore per 1-2 minuti.

6. Remove rack to a beaker con tap acqua.

7. Exchange tap acqua fino alla the acqua è chiara.

8. Dehydrate nei ascending alcohol solutions (50%,70%,80%,95% x 2, 100% x 2) nei columbia colorazione dish(jar)s - Thomas Scientific #8542-E30 .

9. Chiari con xylene (3 - 4 x ) quindi nei columbia colorazione dish(jar)s - Thomas Scientific #8542-E30.

10. Mount coverslip onto a labeled glass slide con Permount o alcuni altre suitable organico mounting medium.

Risultati:

Nuclei e altre basophilic structures sono blue. Citoplasma e acidophilic structures sono light to scuro red.

REFERENCES:

1. Thompson, Samuel W. SELECTED HISTOCHEMICAL AND HISTOPATHOLOGICAL METHODS, Charles C. Thomas, Springfield, IL, 1966.

2. Sheehan, D.C. e Hrapchak, B.B.: THEORY AND PRACTICE OF HISTOTECHNOLOGY, 2nd Edition; Battelle Memorial Institute, Columbus, OH, 1987.

PREPARED BY	G. JAMES PLANER	09/21/90
SUPERCES REVISION	G. JAMES PLANER	06/30/95
REVISED BY	KAREN BIESER	07/18/97
ADOPTED BY	ALAN PESTRONK, M.D.
REVIEWED BY
REPLACED

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