SDSU - Mitocondrio ricostruito con tomografia elettronica

Mitocondrio ricostruito con tomografia elettronica

Autore: T. G. Frey
Ricerca sponsorizzata dalla Western States Affiliata della American Heart Association


Questa pagina vi collega alla dimostrazione della Quicktime Movies e del suo procedimento di tomografia elettronica ed al risultato della ricostruzione tridimensionale di un mitocondrio. Cliccate sulle icone  che rappresentano il filmato che vorreste vedere, o scorrete il bottone sottostante per vedere le immagini in successione al fine di vedere il modello tridimensionale del mitocondrio passo-passo.

 

Rif: Perkins, G., Renken, C., Martone, M.E., Young, S.J., Ellisman, M., and Frey, T. "Electron Tomography of Neuronal Mitochondria: THree-Dimensional Structure and Organization of Cristae and Membrane Contacts" Journal of Structural Biology 119, 260-272 (1997).

Mitocondri da altri tipi di cellule
Fornito da Dr. Guy Perkins, NCMIR, UCSD


Serie di immagini angolate di un mitocondrio

Il primo passo è raccogliere una serie di immagini da diverse angolature di una sezione parzialmente contrastata.

Clicca sulla immagine sottostante per scaricare un filmato Quicktime Movie della serie angolata.

La serie angolata mostra la struttura tridimensionale vista da molte angolature differenti in proiezione su una immagine bi-dimensionale: questa è l'informazione che è necessaria per calcolare la sua struttura in tre-dimensioni. La struttura tridimensionale o "Tomogramma" può essere calcolate da queste immagini.


Tomogramma elettronico di un mitocondrio

Un tomogramma è una immagine tridimensionale.
Il filmato mostra le sezioni del tomogramma esattamente una dopo l'altra.

Clicca sulla immagine sottostante per scaricare il filmato Quicktime Movie.

Questa è una ricostruzione tridimensionale di un mitocondrio dendritico del cervello di pulcino ricostruita tomograficamente da una serie di immagine di un sezione da 0.5 micron. Questo filmato Quicktime Movie procede passo passo attraverso ogni ulteriore sezione del tomogramma tridimensionale.    


Segmentazione del tomogramma

Questa immagine non è collegata  ad un filmato Quicktime Movie

Al fine di creare un modello tridimensionale, le singole sezioni del tomogramma sono segmentate da distinti tracciati dei diversi componenti della membrana; in questo caso la membrana esterna è tracciata in blu scuro, la membrana interna circoscrivente in blu chiaro, e le creste membranali in giallo. Notare, comunque, che le creste membranali e la membrana interna circoscrivente sono una superficie continua. I tracciati di tutte le sezioni sono modellati come una superficie tridimensionale e rappresentati come un modello tridimensionale dal programma Synu sviluppato al National Center for Microscopy and Imaging Research presso UCSD.

In order to create a three-dimensional model, the individual sections of the tomogram are segmented by separately tracing different membrane components; in this case the outer membrane is traced in dark blue, the inner boundary membrane in light blue, and the cristae membrane in yellow. Note, however, the cristae membrane and the inner boundary membrane are one continuous surface. The tracings from all sections are modeled as three-dimensional surfaces and displayed as a three-dimensional model by the program Synu developed at the National Center for Microscopy and Imaging Research at UCSD.


Modello tridimensionale di un mitocondrio completamente segmentato

Clicca sulla immagine sottostante per vedere un filmato Quicktime delle membrane mitocondriali interamente segmentate rotante a 360 gradi.

Il tomogramma è stato segmentato grazie alla evidenziazione manuale  dei bordi della membrana esterna, interna e delle creste membranali rappresentati in blu scuro, blu chiaro e giallo rispettivamente. Solo l'immagine iniziale mostra la membrana esterna; nelle immagini seguenti la membrana interna circoscrivente è rappresentata come traslucida così da poter vedere attraverso  di essa le creste membranali. Nota che la membrana interna circoscrivente e le creste membranali sono ambedue componenti della membrana mitocondriale interna e sono una superficie continua congiunta con connessioni tubulari di 30 nm di diametro chiamate giunzioni crestali.

 he tomogram was segmented by manually contouring into regions bounded by the outer, inner boundary, and cristal membranes shown in dark blue, light blue, and yellow respectively. Only the initial frame shows the outer membrane; in subsequent frames the inner boundary membrane is displayed as translucent so that the cristal membrane can be viewed through it. Note that the inner boundary membrane and the cristal membrane are components of the inner mitochondrial membrane and are one continuous surface joined at 30 nm diameter tubular connections or crista junctions.


Quattro creste e il reticolo endoplasmatico

Clicca sulla immagine sottostante per vedere un filmato Quicktime Movie di quattro creste e del ER.

In questo caso sono rappresentate solo quattro creste in colori differenti per evidenziare le diverse morfologie osservate in questo mitocondrio. Queste vanno dalla cresta rossa in alto a destra che è un singolo tubulo alla cresta bianca più complessa con diverse giunzioni cristali tubulari alla membrana interna circoscrivente fino alla grande cresta  gialla costituita da un grande comparto lamellare con molte giunzioni crestali. Vengono mostrati anche due segmenti del reticolo endoplasmatico adiacenti al mitocondrio in colore verde e grigio.

 this case only four crista are displayed in separate colors to demonstrate the different morphologies observed in this mitochondrion. These range from the red crista at upper right which is a single tubule through somewhat più complex cristae with several tubular crista junctions to the inner boundary membrane to the large yellow crista consisting of a large lamellar compartment with many crista junctions. Two segments of the endoplasmic reticulum adjacent to the mitochondrion are shown in light brown and green.


Mitocondrio del tessuto adiposo bruno

 


Mitocondrio di una neurospora

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Ultimo aggiornamento: 10/21/11

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