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Traduzioni a cura di Natale Marzari

Dopo 41 anni e 5 mesi, nel maggio 2006 la magistratura di Trento ha riconosciuto l'esistenza  e  la gravità di quella malattia rara che nessuna altra istituzione o persona singola della provincia di Trento ancora mi riconosce, e per negare la quale ancora mi perseguita.    Natale Marzari

Scuola di biochimica  e biologia molecolare

 

Elettrodi ad ossigeno


Molte della nostre conoscenze sul trasporto degli elettroni nei mitocondri e nei cloroplasti provengono dalle registrazioni con elettrodo dell'ossigeno. Il tenore in ossigeno in una camera sigillata di  incubazione è controllato continuamente, e si possono osservare gli effetti di varie aggiunte fatte nella camera. Qui sotto c'è una sezione trasversale di un apparecchio tipico:
 

La sezione superiore trasparente e termostatata, contiene l'alloggiamento del campione ed è fissata al complesso inferiore dell'elettrodo con un anello di chiusura. Una membrana sottile di teflon è bloccata fra le due sezioni e separa il mezzo isotonico di incubazione dall'elettrolita forte KCl nello scompartimento dell'elettrodo. Un tappo registrabile   sigilla l'alloggiamento di incubazione e per bloccare i gas della camera che si formano durante gli esperimenti. Il piccolo foro nel centro del tappo consente l'espulsione delle bolle di aria e permette che piccoli volumi dei reagenti siano aggiunti con una siringa al microlitro. Il contenuto dell'alloggiamento è mescolato continuamente con una pulce magnetica.

 

Una piccola tensione di polarizzazione (ca. 0.6 volt) sono applicati fra l'anodo d'argento (+) ed il catodo del
platino (-). L'ossigeno si diffonde attraverso la membrana di teflon ed è ridotto ad acqua al catodo di platino:

O2 + 4H+ + 4e-1 = 2H2O

Il circuito è completato all'anodo d'argento, il quale è lentamente corroso dall'elettrolita KCl:

Ag + Cl- = Ag Cl + e-1

La corrente risultante è proporzionale al tenore in ossigeno nell'alloggiamento del campione. Questo segnale può essere amplificato e registrato.
 

L'intero processo dipende completamente dal rifornimento di ossigeno. Il tasso di diffusione dell'ossigeno al catodo (e quindi la
corrente) dipende dal tenore in ossigeno nell'alloggiamento principale di incubazione. Inoltre dipende da parecchi altri fattori: temperatura, spessore e permeabilità della membrana, viscosità del campione e velocità di mescolatura. Contrariamente agli elettrodi di pH che misurano una posizione di equilibrio, gli elettrodi dell'ossigeno misurano la velocità di un processo
fisico-chimico che è lontano da equilibrio. gli elettrodi di pH hanno una risposta termodinamica intrinseca che è relativamente insensibile alla composizione nel campione ed in
temperatura, ma non c'è calibratura intrinseca per un elettrodo dell'ossigeno - a intervalli normali, o se lo strumento è smontato, deve ri-calibrato contro un campione conosciuto, solitamente aria. È particolarmente importante controllare la temperatura.


 

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